Die Erforschung von Bakterien ist für den Menschen von großer praktischer Bedeutung. Bis heute wurde eine Vielzahl von Prokaryoten entdeckt, die sich in Pathogenität, Verbreitungsgebiet, Form, Größe, Geißelzahl und anderen Parametern voneinander unterscheiden. Um diesen Stamm im Detail zu untersuchen, wird eine bakteriologische Forschungsmethode verwendet.
Welche Methoden gibt es zur Analyse von Bakterienzellen?
Um festzustellen, ob Bakterien pathogen sind, wird die Kultur auf verschiedene Weise untersucht. Darunter:
1. Bakterioskopische Methode.
2. Bakteriologische Methode.
3. Biologische Methode.
Bakterioskopische und bakteriologische Forschungsmethoden basieren direkt auf der Arbeit mit prokaryotischen Zellen, wenn eine biologische Analyse erforderlich ist, um die Wirkung solcher Zellen auf den lebenden Organismus von Versuchstieren zu untersuchen. Je nach Manifestationsgrad bestimmter Krankheitszeichen kann der Wissenschaftler machenSchlussfolgerung über das Vorhandensein oder Fehlen von pathogenen Bakterien in der Probe sowie deren natürliche Vermehrung im Körper des Tieres, um ihre Kultur zu erh alten und in anderen Arbeiten zu verwenden.
Die bakteriologische Forschungsmethode unterscheidet sich von der bakterioskopischen. Im ersten wird eine speziell präparierte Kultur lebender Prokaryoten zur Analyse verwendet, im zweiten wird mit toten oder lebenden Zellen auf einem Objektträger gearbeitet.
Stufen der bakteriologischen Forschungsmethode. Mikrobiologie
Das Prinzip der Untersuchung der Eigenschaften einer Bakterienkultur kann sowohl für Mikrobiologen nützlich sein, die sich zum Ziel gesetzt haben, prokaryotische Zellen zu untersuchen, als auch für Laboranten, deren Aufgabe es ist, die Pathogenität oder Nicht-Pathogenität von Bakterien festzustellen, und diagnostizieren Sie dann den Patienten.
Die Methode zur Untersuchung von Bakterien ist in drei Phasen unterteilt:
1. Isolierung von Bakterien aus der Originalprobe.
2. Bakterien aussäen und eine Reinkultur züchten, ihre Eigenschaften untersuchen.
3. Detaillierte Untersuchung von Bakterienzellen.
Erste Stufe
Die Probe bzw. der Abstrich wird von der freien Oberfläche des Mediums oder vom Patienten genommen. So erh alten wir einen „Cocktail“aus vielen Bakterienarten, der auf einen Nährboden gesät werden muss. Manchmal ist es möglich, die notwendigen Bakterien sofort zu isolieren, wenn man ihre Verteilungsherde im Körper kennt.
Nach zwei oder drei Tagen werden die gewünschten Kolonien ausgewählt undwerden mit Hilfe einer sterilen Öse auf Festmedien von Petrischalen ausgesät. Viele Labore arbeiten mit Reagenzgläsern, die feste oder flüssige Nährmedien enth alten können. So wird die bakteriologische Forschungsmethode in der Mikrobiologie durchgeführt.
Zweite Stufe
Nach Gewinnung einzelner Bakterienkolonien erfolgt eine direkte Makro- und Mikroanalyse. Alle Parameter der Kolonien werden gemessen, die Farbe und Form jeder von ihnen bestimmt. Es ist nicht ungewöhnlich, Kolonien auf einer Petrischale und dann im Ausgangsmaterial zu zählen. Dies ist wichtig bei der Analyse pathogener Bakterien, deren Anzahl vom Grad der Erkrankung abhängt.
Bakteriologische Forschungsmethode, deren 2. Stufe darin besteht, einzelne Kolonien von Mikroorganismen zu untersuchen, kann mit einer biologischen Methode zur Analyse von Bakterien in Verbindung gebracht werden. Ein weiteres Ziel der Arbeit in dieser Phase ist es, die Menge an Quellenmaterial zu erhöhen. Dies kann auf einem Nährmedium erfolgen oder Sie führen ein Experiment in vivo an lebenden Versuchsorganismen durch. Pathogene Bakterien werden sich vermehren und als Ergebnis wird das Blut Millionen von prokaryotischen Zellen enth alten. Aus dem entnommenen Blut ist es einfach, das notwendige Arbeitsmaterial an Bakterien herzustellen.
Dritte Stufe
Der wichtigste Teil der Studie ist die Bestimmung der morphologischen, biochemischen, toxigenen und antigenen Eigenschaften der Bakterienkultur. Gearbeitet wird mit vorgereinigten Kulturen auf Nährmedium, sowie mit Präparaten (oft gefärbt) unter dem Mikroskop.
Inhaberschaft festlegenpathogene oder opportunistische Bakterien der einen oder anderen systematischen Gruppe zuzuordnen sowie ihre Resistenz gegen Arzneimittel zu bestimmen, ermöglicht die bakteriologische Forschungsmethode. Stufe 3 - Antibiotika, d.h. Analyse des Verh altens von Bakterienzellen unter den Bedingungen des Inh alts von Arzneimitteln in der Umwelt.
Die Untersuchung der Antibiotikaresistenz einer Kultur ist von großer praktischer Bedeutung, wenn es notwendig ist, einem bestimmten Patienten die notwendigen und vor allem wirksamen Medikamente zu verschreiben. Hier kann die bakteriologische Forschungsmethode helfen.
Was ist ein Wachstumsmedium?
Zur Entwicklung und Vermehrung müssen sich Bakterien in vorgefertigten Nährmedien befinden. Je nach Konsistenz können sie flüssig oder fest sein und nach Herkunft - pflanzlich oder tierisch.
Grundlegende Medienanforderungen:
1. Sterilität.
2. Maximale Transparenz.
3. Optimale Indikatoren für Säuregeh alt, osmotischen Druck, Wasseraktivität und andere biologische Werte.
Gewinnung isolierter Kolonien
1. Drygalsky-Methode. Es besteht darin, dass ein Abstrich mit verschiedenen Arten von Mikroorganismen auf die Bakterienschleife aufgetragen wird. Diese Schleife wird entlang der ersten Petrischale mit einem Nährmedium geführt. Weiterhin wird ohne Wechsel der Schleife das Restmaterialverfahren auf der zweiten und dritten Petrischale durchgeführt. Auf den letzten Proben der Kolonie werden die Bakterien also nicht zu dicht ausgesät, wodurch die Möglichkeit vereinfacht wird, die für die Arbeit erforderlichen zu finden. Bakterien.
2. Koch-Methode. Es verwendet Reagenzgläser mit geschmolzenem Nährmedium. Dort wird eine Schlaufe oder Pipette mit einem Bakterienabstrich platziert, wonach der Inh alt des Reagenzglases auf eine spezielle Platte gegossen wird. Agar (oder Gelatine) verfestigt sich nach einiger Zeit, und es ist leicht, die gewünschten Zellkolonien in seiner Dicke zu finden. Es ist wichtig, die Bakterienmischung in Reagenzgläsern vor Arbeitsbeginn zu verdünnen, damit die Konzentration an Mikroorganismen nicht zu hoch wird.
Die bakteriologische Forschungsmethode, deren Etappen auf der Isolierung der gewünschten Bakterienkultur beruhen, kommt ohne diese beiden Methoden zum Auffinden isolierter Kolonien nicht aus.
Antibiogramm
Visuell kann die Reaktion von Bakterien auf Medikamente auf zwei praktische Arten gesehen werden:
1. Papierscheibenmethode.
2. Züchtungsbakterien und Antibiotikum in einem flüssigen Medium.
Die Papierscheibenmethode erfordert eine Kultur von Mikroorganismen, die auf einem festen Nährmedium gezüchtet wurden. Legen Sie auf ein solches Medium ein paar mit Antibiotika getränkte runde Papierstücke. Wenn das Medikament die Neutralisierung von Bakterienzellen erfolgreich bewältigt, wird es nach einer solchen Behandlung einen Bereich ohne Kolonien geben. Bei negativer Reaktion auf das Antibiotikum überleben die Bakterien.
Bei Verwendung eines flüssigen Nährmediums bereiten Sie zunächst mehrere Reagenzgläser mit einer Bakterienkultur in unterschiedlichen Verdünnungen vor. In diese Reagenzgläser werden Antibiotika gegeben und tagsüber wird der Prozess der Wechselwirkung zwischen der Substanz und den Mikroorganismen beobachtet. Als Ergebnis wird ein hochwertiges Antibiogramm erh alten, nach dem es möglich istBeurteilen Sie die Wirksamkeit des Medikaments für eine bestimmte Kultur.
Hauptaufgaben der Analyse
Hier sind die Ziele und Etappen der bakteriologischen Forschungsmethode aufgelistet.
1. Erh alten Sie das Ausgangsmaterial, das zur Isolierung von Bakterienkolonien verwendet wird. Es kann sich um einen Abstrich von der Oberfläche eines beliebigen Objekts, einer Schleimhaut oder einem Hohlraum eines menschlichen Organs oder um einen Bluttest handeln.
2. Kultivierung von Kultur auf einem festen Nährmedium. Nach 24-48 Stunden finden sich Kolonien verschiedener Bakterienarten auf der Petrischale. Wir wählen das Gewünschte nach morphologischen und/oder biochemischen Kriterien aus und führen damit weitere Arbeiten durch.
3. Vermehrung der resultierenden Kultur. Das bakteriologische Untersuchungsverfahren kann auf einem mechanischen oder biologischen Verfahren zur Erhöhung der Anzahl von Bakterienkulturen beruhen. Im ersten Fall wird mit festen oder flüssigen Nährmedien gearbeitet, auf denen sich Bakterien in einem Thermostat vermehren und neue Kolonien bilden. Die biologische Methode benötigt natürliche Bedingungen zur Vermehrung der Bakterienzahl, sodass hier das Versuchstier mit Mikroorganismen infiziert wird. Nach einigen Tagen lassen sich viele Prokaryoten in einer Blutprobe oder einem Abstrich nachweisen.
4. Arbeiten mit gereinigter Kultur. Um die systematische Position von Bakterien sowie ihre Zugehörigkeit zu Krankheitserregern zu bestimmen, ist eine gründliche Analyse der Zellen nach morphologischen und biochemischen Merkmalen erforderlich. Bei der Untersuchung pathogener Gruppen von Mikroorganismen ist es wichtig zu wissenwie wirksam sind Antibiotika.
Dies war ein allgemeines Merkmal der bakteriologischen Forschungsmethode.
Merkmale der Analyse
Die Hauptregel der bakteriologischen Forschung ist maximale Sterilität. Wenn Sie mit Reagenzgläsern arbeiten, sollten Kulturen und Subkulturen von Bakterien nur über einer erhitzten Spirituslampe durchgeführt werden.
Alle Stufen der bakteriologischen Forschungsmethode erfordern die Verwendung einer speziellen Öse oder einer Pasteurpipette. Beide Werkzeuge müssen in der Flamme einer Spirituslampe vorbehandelt werden. Wie bei der Pasteurpipette muss hier vor der thermischen Sterilisation die Spitze der Pipette mit einer Pinzette abgebrochen werden.
Die Technik des Aussäens von Bakterien hat auch ihre eigenen Eigenschaften. Beim Beimpfen auf festen Medien wird zunächst eine Bakterienschleife über die Oberfläche des Agars geführt. Die Schleife sollte natürlich bereits eine Probe von Mikroorganismen auf der Oberfläche haben. Auch die Inokulation in das Kulturmedium wird praktiziert, wobei die Öse oder Pipette bis zum Boden der Petrischale reichen sollte.
Bei der Arbeit mit flüssigen Medien werden Reagenzgläser verwendet. Dabei ist darauf zu achten, dass keine Flüssigkeiten die Ränder von Laborgläsern oder Stopfen berühren und die verwendeten Instrumente (Pipette, Öse) keine Fremdkörper und Oberflächen berühren.
Die Bedeutung der biologischen Forschungsmethode
Bakterienprobenanalyse hat ihre praktischen Anwendungen. Vor allemBakteriologische Forschungsmethode kann in der Medizin eingesetzt werden. Beispielsweise ist es notwendig, die Mikroflora des Patienten zu untersuchen, um die richtige Diagnose zu stellen und den richtigen Behandlungsverlauf zu entwickeln. Hier hilft ein Antibiogramm, das die Wirkung von Medikamenten gegen den Erreger aufzeigt.
Die Analyse von Bakterien wird im Labor verwendet, um gefährliche Krankheiten wie Tuberkulose, Rückfallfieber oder Tripper zu erkennen. Es wird auch verwendet, um die bakterielle Zusammensetzung der Mandeln und Organhöhlen zu untersuchen.
Bakteriologische Forschungsmethode kann verwendet werden, um die Kontamination der Umwelt zu bestimmen. Anhand der Daten zur quantitativen und qualitativen Zusammensetzung eines Abstrichs von der Oberfläche eines Objekts wird der Besiedelungsgrad dieser Umgebung durch Mikroorganismen bestimmt.
