Hepatitis C ist eine Infektion der Leber, die durch das Flaviviridae HCV-Virus verursacht wird, das aus einem oder mehreren RNA-Molekülen besteht. In der Regel werden zum Nachweis einer Hepatitis C bei einem Patienten eine Reihe von diagnostischen Maßnahmen durchgeführt, PCR ist eine Analyse, die die Diagnose sicher bestätigt. Oft wird die Schlussfolgerung von Ärzten gezogen, wenn der Patient bereits die ersten Anzeichen der Krankheit hat.
Was ist Hepatitis C
Eine Leberschädigung durch eine Virusinfektion, die durch Blut oder Sexualkontakt übertragen wird, nennt man in der Medizin Hepatitis C. Der Erreger ist ein RNA-h altiges Virus aus nicht-zellulären Infektionserregern der Familie Flaviviridae. Die Infektion kann lange Zeit im Körper bleiben, ohne sich zu zeigen. Daher gilt Hepatitis C (als Diagnose) nur dann als gerechtfertigt, wenn ein Mikroorganismus durch einen Bluttest mittels PCR RNA RNA nachgewiesen wird.
Flavivirus wird nicht in künstlich gezüchteten isolierten Zellen produziert. Bei der Reproduktion erzeugt der Infektionserreger immunologisch unterschiedliche Modifikationen. Diese Faktoren hindern den Körper am Gebenangemessene Schutzreaktion, und Experten haben Schwierigkeiten, einen wirksamen Impfstoff zu entwickeln.
Das Virus wird parenteral übertragen. Für eine Ansteckung muss es in ausreichender Menge direkt in die Blutbahn gelangen.
Welche Tests werden für Hepatitis C durchgeführt?
Virale Pathologien der Leber werden anhand von Labortests diagnostiziert. Klinische Studien zu Hepatitis C werden durchgeführt, indem fremde und gefährliche Antigene oder Proteinverbindungen (Antikörper) im Biomaterial des Patienten, hauptsächlich im Blut, untersucht werden.
- Enzymatischer Immunoassay (ELISA). Das Verfahren basiert auf dem Nachweis von IgM-Antikörpern im Blut. Immunglobulin gilt als das größte und ist ein Pentamer. Es manifestiert sich in der primären Schutzreaktion von Lymphozyten auf eine unbekannte Fremdsubstanz.
- Radioimmunoassay (RIA) - quantitative Bestimmung von lgM-Immunglobulin unter Verwendung eines markierten radioaktiven Jodisotops.
- PCR von Hepatitis C - Bestimmung viraler RNA im Biomaterial (Blut). Diese Analyse bestätigt zuverlässig die Diagnose.
IgG-Tests sind nicht zuverlässig. Sein Vorhandensein im Blutserum kann nicht nur auf das Vorhandensein eines Flavivirus hinweisen, sondern auch auf eine andere frühere Infektion mit demselben Erreger.
Was bestimmt die PCR-Analyse
Die Polymerase-Kettenreaktion (PCR) basiert auf der Identifizierung von DNA-Regionen, die für bestimmte Krankheitserreger in Proben von Forschungsmaterial (Epithel, Blut) spezifisch sind. Die Analyse ermöglicht die Identifizierung pathogener Kleinstorganismen (Viren) durch den Nachweis ihrer RNA oder DNA in biologischem Material.
Laborverfahren zum Nachweis von Antikörpern Hepatitis C PCR wird in 3 Stufen durchgeführt:
- Auswählen. Das untersuchte Biomaterial wird von Verunreinigungen gereinigt und DNA wird in der mobilen Phase der Chromatographiesäule gewonnen.
- Verstärkung. Die Analyse erfolgt im Geräte-Thermostat-Cycler. Es heizt und kühlt die Reagenzgläser mit einer gewissen Zyklizität. Für eine Studie werden bis zu 35 Zyklen durchgeführt. Das Ergebnis ist eine ausreichende Anzahl von DNA-Fragmenten, um den Erreger nachzuweisen, zu identifizieren und zu bewerten.
- Elektrophorese. Die resultierenden Fragmente werden in ein Gel mit unterschiedlicher Agarosesättigung gegeben und eine Elektrophorese durchgeführt. Das resultierende Elektropherogramm wird auf einem Computer analysiert.
Es wird nicht nur die Standard-PCR-Studie verwendet, sondern auch die Real-Time-PCR-Analyse. Dies ist eine Echtzeitdiagnose. Die Methode ermöglicht eine qualitative und quantitative Analyse, die es ermöglicht, die Entstehung und Dynamik der Krankheit zu identifizieren und eine Therapie zu verschreiben, die darauf abzielt, die Ursache des Ursprungs der Pathologie zu beseitigen. Real-Time-PCR wird auch verwendet, um eine Reinkultur von Infektionserregern zu bestimmen (Genotypisierung).
Wie wird der Polymerase-Kettenreaktionstest durchgeführt
Zur Diagnose kann jede menschliche biologische Flüssigkeit verwendet werden. Biomaterial zum Testen auf Hepatitis C ist normalerweise Blut.
Die Probenahme zur Diagnostik erfolgt im VerfahrenBüro. Verwenden Sie zur Blutentnahme Einweg-Reagenzgläser mit einer Substanz, die die Blutgerinnung hemmt. Aktivitäten, die darauf abzielen, die Ausbreitung von Infektionserregern zu verhindern, tragen dazu bei, das Eindringen eines anderen Mikroorganismenstamms von außen zu verhindern.
Blut für die PCR von Hepatitis C wird morgens auf nüchternen Magen abgenommen. Die Probe wird sofort an das Labor geschickt. Das Biomaterial darf bei einer Temperatur von +4 bis +8 Grad Celsius gelagert werden. Container sind beschriftet und mit Wegbeschreibungen versehen. Testergebnisse sind innerhalb von 48 Stunden verfügbar, manchmal früher.
PCR-Typen
Das Anwendungsspektrum der Polymerase-Kettenreaktion ist sehr breit. Infektiologen bestimmen mittels PCR Hepatitis B, durch blutsaugende Insekten übertragene Krankheiten, Aids, Tuberkulose. In der Onkologie werden mit dieser Methode Tumorzellen frühzeitig erkannt.
Es gibt ungefähr vierzehn Arten von Analysen. Die Verwendung des einen oder anderen Typs hängt vom Umfang und den Endergebnissen der Analysen ab. Einige PCR-Typen sind unverzichtbar, wenn das Ergebnis innerhalb von 20 Minuten benötigt wird.
Zur Diagnose von Hepatitis C werden 3 Arten von Polymerase-Kettenreaktionen verwendet:
- Die qualitative Bewertung kann entweder positiv sein, was auf das Vorhandensein einer Infektion im Körper hinweist, oder negativ, was auf das Fehlen eines Flavivirus hinweist.
- Real-Time-PCR (quantitative Analyse) - bestimmt die quantitative RNA des Erregers in IE/ml.
- Genotypisierung ist eine Analyse, die den Typ (Genotyp) des Virus aufzeigt.
Um die Krankheit genau zu identifizieren und zu bestimmen, gefolgt vonalle drei Arten von Studien werden verwendet, um eine optimale Therapie zu verschreiben.
Qualitative Polymerase-Kettenreaktionsanalyse
Eine Analyse ist für jeden obligatorisch, der einen ELISA hat, der Antikörper gegen HCV nachgewiesen hat. Die qualitative PCR für Hepatitis C ist der Standard-Empfindlichkeitstest. Die Methode dient nur dem Nachweis, es erfolgt keine Zählung oder Isolierung anderer Substanzen.
Zum Nachweis von Antikörpern werden spezielle Testsysteme mit einer Empfindlichkeitsschwelle von mindestens 50 IE/ml verwendet. Werden Antikörper nachgewiesen, werden weitere Abklärungstests verordnet. Wenn das Ergebnis negativ ist, werden keine weiteren Tests durchgeführt.
In einigen Fällen kann ein falsch negatives Ergebnis auf inkompetentes Laborpersonal oder Reagenzien von schlechter Qualität zurückzuführen sein. Für die Versicherung ist es besser, die Analyse an anderer Stelle zu wiederholen.
Quantitative PCR
Die Methode wird verwendet, um die Anzahl der Flaviviren in einem Reaktionszyklus direkt zu untersuchen. Zur genauen Messung werden zur Hybridisierung verwendete DNA-Fragmente oder fluoreszenzmarkierte Primer verwendet. Mit dem Farbstoff SYBL Green gibt es eine kostengünstige Detektionsoption. Der Farbstoff wird in eine kleine Rille in der DNA eingekeilt und färbt sich blau, wenn er mit einem Laser bestrahlt wird.
Die Konzentration wird vom Apparate-Verstärker in digitalem Äquivalent bestimmt. Die Werte können von Labor zu Labor leicht variieren und sollten daher mit Referenzwerten verglichen werden.
Quantitative PCRHepatitis C hilft bei der Auswahl der optimalen Dosierung von Medikamenten und der Bestimmung der Therapiedauer. Die Häufigkeit der Studie hängt vom Stadium der Erkrankung, der Art des Genotyps und dem vorgeschriebenen Behandlungsverlauf ab.
Genotypbestimmung
Das Hepatitis-C-Virus hat eine variable genetische Ausstattung. Zahlreiche Modifikationen machen die Herstellung eines Impfstoffs unmöglich und erschweren auch die Therapie. Insgesamt wurden 11 Genotypen und 100 Subtypen identifiziert und erfasst. In den Ländern der ehemaligen UdSSR werden bei mit Hepatitis C infizierten Personen mit PCR hauptsächlich die Genotypen 1b und 3 nachgewiesen.
Bei Vorliegen eines der Genotypen kann es zu Zirrhose oder Leberkrebs kommen. Deshalb ist es so wichtig, den Virus rechtzeitig zu erkennen.
Für einige Patienten sind bestimmte Medikamente zur Bekämpfung von HCV giftig. Mit der Genotypisierung können Sie die Art des Proteins bestimmen und ein wirksames Medikament verschreiben.
In den Ergebnissen der Typisierungstests gibt es eine Zahl mit einem lateinischen Kleinbuchstaben, die den Genotyp des Virus angibt. Wenn HCV nachgewiesen, aber nicht typisiert wird, bedeutet dies, dass die Person einen Genotyp hat, der für ein bestimmtes geografisches Gebiet nicht typisch ist.
Analyseergebnisse
Der Arzt beschäftigt sich mit der Entzifferung der Ergebnisse. Nur Daten aus mehreren Studien (zusammen mit Anamnese und Untersuchung) können ein wirkliches Gesamtbild der Krankengeschichte geben.
- Bei einem gesunden Menschen zeigt ein Test auf eine qualitative Reaktion im Biomaterial nichts. Wird der Wert „erkannt“angezeigt, ist die Infektion bestätigt und der PatientBenötigt eine weitere Diagnose, gefolgt von einer Behandlung.
- Bestimmung der Anzahl der Infektionserreger ermöglicht eine Einschätzung der Viruslast des Körpers. Normalerweise weist die quantitative Hepatitis-C-PCR den Erreger nicht nach. Ein Indikator von bis zu 810^5 gilt als geringe Belastung und garantiert bei richtiger Therapie ein günstiges Ergebnis. Höhere Werte bedürfen einer eingehenden Untersuchung und Festlegung einer Langzeittherapie, für deren positiven Verlauf niemand verbürgen kann.
- Positive Genotypisierungsergebnisse zeigen an, welcher Genotyp erkannt wird. Ein negatives Ergebnis zeigt entweder das Fehlen eines Flavivirus oder das Vorhandensein eines für diese Region untypischen Genotyps an.
Was zeigt ein positiver PCR-Test an
Jede schwere Krankheit erfordert eine umfassende Diagnose. Eine positive Hepatitis-C-PCR bestätigt die Diagnose, aber Vorhersagen können nur nach zusätzlichen Labor- und Instrumentenstudien getroffen werden.
Der Nachweis eines Virus gibt kein vollständiges Bild der Pathologie. Es ist notwendig, seine Art und Art zu identifizieren, um festzustellen, wie es die Leber und andere Organe beeinflusst. Früherkennung von HCV hat oft ein günstiges therapeutisches Ergebnis.
Negative PCR mit positivem ELISA
Wenn man die für einen Leberschaden charakteristischen Symptome beobachtet, besteht eine hohe Wahrscheinlichkeit, dass die Infektion bereits in den Körper eingedrungen ist. Wenden Sie sich daher an einen Hepatologen oder einen Spezialisten für Infektionskrankheiten. Während der Gespräche wird der Facharzt eine Anamnese erheben und die notwendige Untersuchung verordnen.
Wenndie Ergebnisse von Studien zur Hepatitis-C-PCR negativ sind und der Enzymimmunoassay positiv ist, weist dies auf das Vorhandensein von Antikörpern gegen das Flavivirus im Blut hin. Dies geschieht normalerweise, wenn die Infektion in geringer Menge in den Körper eindringt, sodass das Immunsystem alleine damit fertig wird. Aber auch solche Personen gelten als infiziert und müssen alle 6 Monate untersucht werden. Wird einer Person bei solchen Testergebnissen eine kostenlose ärztliche Untersuchung verweigert, sollte zur Erh altung der Gesundheit besser eine kostenpflichtige PCR durchgeführt werden und bei positivem Ergebnis ein Facharzt zur Diagnose und Behandlung kontaktiert werden.
Vor- und Nachteile der Methode
Bei der Diagnosesicherung von Hepatitis C hat die PCR mehrere Vorteile:
- Erreger-Früherkennung.
- Genaue Definition des Virus.
- Effizienz der Diagnostik.
- Mindestfehlerrate.
- Hohe Empfindlichkeit.
Nachteile der Methode:
- Hohe Analysekosten. Der Test erfordert teure Geräte, Reagenzien und hochqualifiziertes medizinisches Personal. Alles zusammen ergibt eine beachtliche Summe.
- Strenge Anforderungen für den Transport von Biomaterial.
Behandlung einer Leberentzündung
Die PCR-Analyse für das Hepatitis-C-Virus gilt als grundlegend für die Diagnose, ist aber nicht endgültig. Damit die Therapie wirksam ist, sind eine Reihe zusätzlicher Labor- und Instrumentenstudien erforderlich. Nachdem alle bestandendiagnostische Maßnahmen der Arzt verordnet die Behandlung:
- Diät Nr. 5 wird verschrieben.
- Alkohol ist komplett ausgeschlossen.
- Gemeinsamer Empfang von Interferon und Ribavirin für 25 Tage.
- Kurse der Hepaprotektoren "Essentiale", "Karsil", "Phosphogliv".
- In besonderen Fällen kommt die diskrete Plasmapherese zum Einsatz.
Medikamente, die von einem Hepatologen verschrieben werden, werden regelmäßig angewendet, ohne die Dosierung zu ändern. Die Dauer der Einnahme der Medikamente wird vom Arzt nach Bestehen der Kontrolltests festgelegt. Nach Abschluss der Therapie müssen Sie alle sechs Monate zum Arzt gehen.
PCR-Diagnostik ermöglicht es, den Erreger der Hepatitis C frühzeitig zu identifizieren. Dies trägt zur Wirksamkeit der Therapie bei und verhindert den Übergang der Krankheit in gefährliche Formen wie Leberzirrhose und hepatozelluläres Karzinom.
