Vor kurzem wurde ein zuverlässiges, hochempfindliches und schnelles Verfahren zur Diagnose verschiedener menschlicher Infektionskrankheiten entwickelt. Dieses Verfahren wird "PCR-Analyse" genannt. Was es ist, was seine Essenz ist, welche Mikroorganismen es offenbaren kann und wie man es richtig einnimmt, erzählen wir in unserem Artikel.
Discovery-Verlauf
erfand 1983 die Methode der Polymerase-Kettenreaktion (PCR) durch den amerikanischen Wissenschaftler Kary Mullis. Ursprünglich wurde die diagnostische Methode von der Cetus Corporation patentiert, in der ihr Schöpfer arbeitete. Aber 1992 wurden alle Rechte und Patente an Hoffman-La Roche verkauft. Danach stellte sich heraus, dass ähnliche Studien parallel durchgeführt und von anderen amerikanischen Biologen wie Alice Chen, David Edgar, John Trell aufgezeichnet wurden. 1980 befassten sich auch die sowjetischen Wissenschaftler A. Slyusarenko, A. Kaledin und S. Gorodetsky mit diesem Problem. Daher war es unmöglich, den alleinigen Urheberrechtsinhaber zu bestimmen. Viele prominente Biochemiker haben einen gewissen Beitrag zur Entwicklung der Polymerase-Kettenreaktionstechnik geleistet und ihre Innovationen patentieren lassen. Derzeit die AnalysePCR wird überall in speziell ausgestatteten Labors durchgeführt.
Die Essenz der PCR-Diagnosemethode
PCR-Analyse: Was ist das und wie funktioniert es? Die Essenz der Methode besteht darin, das Volumen einer bestimmten mikrobiellen Umgebung unter künstlichen Bedingungen mit einem speziellen DNA-Polymerase-Enzym zu erhöhen. Dazu wird das vorhandene DNA-Material um ein Vielfaches vermehrt. Daher wird bei Vorhandensein eines pathogenen Mikroorganismus in der Probe seine Menge aufgrund biochemischer Labormanipulationen erhöht, und es wird nicht schwierig sein, das Bakterium unter einem Mikroskop nachzuweisen.
Wie wird Materialforschung betrieben?
Erforderlich für die Analyse:
- DNA-Matrix;
- Primer, die die Enden eines Materialstücks verbinden;
- hitzebeständiges DNA-Polymerase-Enzym;
- Chemikalien, die dafür sorgen, dass Enzyme richtig funktionieren;
- Pufferlösung, die notwendig ist, um die geeigneten Bedingungen für das Wachstum und die Entwicklung von DNA-Material zu schaffen.
Um eine PCR durchzuführen, werden 25-30 Wiederholungen durchgeführt, die aus drei Phasen bestehen: Denaturierung, Annealing und Elongation.
Für die Analyse der Polymerkettenreaktion wird ein spezielles Gerät verwendet - ein Verstärker. Mit modernen Geräten können Sie das erforderliche Programm zum Heizen und Kühlen von Rohren einstellen, um Fehler während der Diagnose zu beseitigen.
Wo wird Diagnostik eingesetzt?
Die Methode der Polymerkettenreaktion wird in verschiedenen Bereichen der Medizin eingesetzt:
- Kriminelle mites identifiziert genetisches Material wie Haare, Speichel oder Blut;
- PCR-Bluttest hilft bei der Genotypisierung, um zum Beispiel eine individuelle genetisch bedingte Reaktion auf ein bestimmtes Medikament zu erkennen;
- Verwenden dieser Methode, um das Vorhandensein familiärer Bindungen zwischen Personen festzustellen;
- Das beliebteste PCR-Verfahren ist in der medizinischen Diagnostik zur Bestimmung verschiedener Infektionskrankheiten geworden.
Welche Infektionen erkennt die PCR?
Die Medizin hat also lange und erfolgreich die PCR-Analyse eingesetzt. Was es ist, wissen wir bereits. Und welche Krankheitserreger lassen sich damit nachweisen? Die folgenden Infektionskrankheiten werden mit der PCR-Methode diagnostiziert:
- Hepatitis A, B, C;
- Ureaplasmose;
- Candidiasis;
- Chlamydien;
- Mykoplasmose;
- Gardnerellose;
- infektiöse Mononukleose;
- Trichomoniasis;
- Papillomavirus-Infektion;
- Tuberkulose;
- Herpesinfektion Typ 1 und 2;
- Helikobakteriose;
- Zytomegalievirus;
- Diphtherie;
- Salmonellose;
- HIV-Infektion.
Auch PCR-Methoden werden in der Krebsdiagnostik eingesetzt.
Vorteile der Methode
PCR-Diagnostik hat mehrere Vorteile:
- Hohe Empfindlichkeit. Selbst in Anwesenheit von nur wenigen Molekülen von Mikroorganismen-DNA bestimmt die PCR-Analyse das Vorhandensein einer Infektion. Die Methode hilft bei chronischen und latent auftretenden Erkrankungen. Oft ist in solchen Fällen der Mikroorganismusist ansonsten nicht kultivierbar.
- Jedes Material ist für die Forschung geeignet, wie Speichel, Blut, Genitalsekrete, Haare, Epithelzellen. Am gebräuchlichsten ist die Analyse von Blut und Urogenitalabstrich für PCR.
- Keine langfristige Ernte erforderlich. Der automatisierte Diagnoseprozess ermöglicht es Ihnen, die Ergebnisse der Studie nach 4-5 Stunden zu erh alten.
- Die Methode ist fast 100% zuverlässig. Es wurden nur vereinzelte Fälle von falsch negativen Ergebnissen verzeichnet.
- Die Fähigkeit, mehrere Arten von Krankheitserregern anhand einer einzigen Materialprobe zu identifizieren. Dies beschleunigt nicht nur die Diagnose der Krankheit, sondern reduziert auch die Materialkosten erheblich. Oft verordnet der Arzt eine umfassende PCR-Analyse. Der Preis der Untersuchung, die aus der Bestimmung von sechs Erregern besteht, beträgt etwa 1.500 Rubel.
Empfehlungen zur Analysevorbereitung
Damit die Ergebnisse während der PCR-Studie zuverlässig sind, müssen Sie den Test durchführen und dabei die Empfehlungen zur vorläufigen Vorbereitung auf die Diagnose befolgen:
- Vor Speichelspenden sollten Sie 4 Stunden vor der Speichelentnahme auf Essen und Einnahme von Medikamenten verzichten. Spülen Sie Ihren Mund unmittelbar vor dem Eingriff mit kochendem Wasser aus.
- Die obigen Regeln sollten auch bei der Entnahme einer Probe von der Innenseite der Wange befolgt werden. Nach dem Spülen empfiehlt sich eine leichte Hautmassage, um das Sekret der Drüse hervorzuheben.
- Urin wird normalerweise zu Hause gesammelt. Dazu müssen Sie eine gründliche Toilette durchführenGenitalien. Sammeln Sie 50-60 ml Urin in einem sterilen Plastikbehälter. Um die Reinheit des Materials zu gewährleisten, wird Frauen empfohlen, einen Tampon in die Vagina einzuführen, und Männern, die Hautf alte so weit wie möglich zurückzuziehen. Spende nicht während deiner Periode.
- Zur Samenspende müssen Sie vor der Entnahme 3 Tage lang auf Geschlechtsverkehr verzichten. Ärzte raten auch davon ab, in die Sauna zu gehen, ein heißes Bad zu nehmen, Alkohol und stark gewürzte Speisen zu trinken. 3 Stunden vor dem Test dürfen Sie nicht urinieren.
- Um beispielsweise einen Urogenitalabstrich zu machen, wenn ein PCR-Test auf Chlamydien durchgeführt wird, wird sowohl Frauen als auch Männern empfohlen, 3 Tage lang sexuelle Ruhe einzulegen. Antibakterielle Medikamente sollten 2 Wochen vor der Analyse nicht eingenommen werden. Für eine Woche müssen Sie aufhören, Intimgele, Salben, Vaginalzäpfchen und Spülungen zu verwenden. 3 Stunden vor der Untersuchung müssen Sie auf das Wasserlassen verzichten. Während der Menstruation wird keine Probenahme durchgeführt, nur 3 Tage nach Beendigung der Blutentnahme können Sie einen Urogenitalabstrich nehmen.
PCR während der Schwangerschaft
In der Zeit der Erwartung des Babys sind viele sexuell übertragbare Infektionen äußerst gefährlich für die normale Entwicklung des Fötus. STDs können intrauterine Wachstumsverzögerung, Fehlgeburt oder Frühgeburt, angeborene Fehlbildungen des Kindes hervorrufen. Daher ist es äußerst wichtig, sich in der Frühschwangerschaft einer PCR-Untersuchung zu unterziehen. Es ist notwendig, die Analyse bei der Registrierung zu bestehen - bis zu 12 Wochen.
Das Material wird mit einer speziellen Bürste aus dem Zervikalkanal entnommen. Der Eingriff ist schmerzfrei und stellt keine Gefahr für das Baby dar. In der Regel wird während der Schwangerschaft eine Analyse auf Chlamydien nach der PCR-Methode sowie auf Ureaplasmose, Mykoplasmose, Cytomegalovirus, Herpes, Papillomavirus durchgeführt. Ein solcher Untersuchungskomplex heißt PCR-6.
PCR zur HIV-Diagnose
Da die Methode der Polymerase-Kettenreaktion sehr empfindlich auf Veränderungen im Körper und die Bedingungen der Diagnose reagiert, können viele Faktoren das Ergebnis beeinflussen. Daher ist die PCR-Analyse für eine HIV-Infektion keine zuverlässige Methode, ihre Effizienz beträgt 96–98 %. In den restlichen 2-4 % der Fälle liefert der Test falsch positive Ergebnisse.
Aber in manchen Situationen ist die HIV-PCR-Diagnostik unverzichtbar. Es wird normalerweise Personen mit einem falsch negativen ELISA-Ergebnis verabreicht. Solche Indikatoren weisen darauf hin, dass eine Person noch keine Antikörper gegen das Virus entwickelt hat und sie nicht ohne eine mehrfache Erhöhung der Anzahl nachgewiesen werden können. Genau das kann durch einen PCR-Bluttest erreicht werden.
Diese Diagnostik ist auch bei Kindern im ersten Lebensjahr einer HIV-positiven Mutter notwendig. Die Methode ist die einzige Möglichkeit, den Status eines Kindes zuverlässig zu bestimmen.
PCR zur Diagnose von Hepatitis
Die Polymerase-Kettenreaktionsmethode ermöglicht den Nachweis der DNA des Hepatitis-A-, -B-, -C-Virus lange vor der Bildung von Antikörpern gegen die Infektion oder dem Auftreten von Krankheitssymptomen. Die PCR-Analyse für Hepatitis C ist besonders effektiv, da diese Krankheit in 85% der Fälle asymptomatisch und ohne istEine rechtzeitige Behandlung tritt in das chronische Stadium ein.
Der rechtzeitige Nachweis des Erregers hilft, Komplikationen und eine Langzeitbehandlung zu vermeiden.
Umfassende PCR-Untersuchung
Komplexe PCR-Analyse: Was ist das? Hierbei handelt es sich um eine Untersuchung nach der Methode der Polymerkettenreaktion, bei der mehrere Infektionsarten gleichzeitig bestimmt werden: Mycoplasma genitalium, Mycoplasma hominis, Gardnerella vaginalis, Candida, Trichomonas, Cytomegalovirus, Ureaplasma urealiticum, Herpes Typ 1 und 2, Tripper, Papillomavirus. Der Preis für eine solche Diagnostik liegt zwischen 2000 und 3500 Rubel. abhängig von der Klinik, den verwendeten Materialien und Geräten sowie der Art der Analyse: qualitativ oder quantitativ. Was in Ihrem Fall notwendig ist, entscheidet der Arzt. In einigen Fällen reicht es aus, nur das Vorhandensein des Erregers festzustellen, in anderen, beispielsweise bei einer HIV-Infektion, spielt ein quantitativer Titer eine wichtige Rolle. Bei der Diagnose aller oben genannten Erreger heißt die Untersuchung "PCR-12-Analyse".
Abschrift der Analyseergebnisse
Die PCR-Analyse zu entziffern ist nicht schwierig. Es gibt nur 2 Skalen des Indikators - "positives Ergebnis" und "negatives Ergebnis". Wird ein Krankheitserreger entdeckt, kann der Arzt das Vorliegen der Krankheit mit 99-prozentiger Sicherheit bestätigen und mit der Behandlung des Patienten beginnen. Bei einer quantitativen Methode zur Bestimmung einer Infektion zeigt die entsprechende Sp alte den numerischen Indikator der nachgewiesenen Bakterien an. Nur ein Arzt kann das Ausmaß der Erkrankung feststellen und die notwendige Behandlung verschreiben.
In einigen Fällen, zum Beispiel bei der Bestimmung einer HIV-Infektion durch PCR, mit einem negativen Ergebnis, ist es notwendig, zusätzliche Untersuchungen durchzuführen, um die erh altenen Indikatoren zu bestätigen.
Wo kann man sich testen lassen?
Wo kann man einen PCR-Test machen: in einer öffentlichen Klinik oder in einem privaten Labor? Leider sind in kommunalen medizinischen Einrichtungen die Geräte und Methoden oft ver altet. Daher ist es besser, privaten Labors mit moderner Ausstattung und hochqualifiziertem Personal den Vorzug zu geben. Darüber hinaus erh alten Sie in einer Privatklinik viel schneller Ergebnisse.
In Moskau bieten viele private Labors PCR-Analysen für verschiedene Infektionen an. Beispielsweise wird in Kliniken wie Vita, Complex Clinic, Happy Family, Uro-Pro eine PCR-Analyse durchgeführt. Der Preis der Untersuchung beträgt 200 Rubel. zur Identifizierung eines Erregers.
Es kann geschlussfolgert werden, dass die Diagnose von Infektionskrankheiten mittels PCR in den meisten Fällen eine schnelle und zuverlässige Möglichkeit darstellt, den Erreger im Körper bereits im Frühstadium einer Infektion nachzuweisen. In bestimmten Fällen lohnt es sich jedoch, andere Diagnosemethoden zu wählen. Nur ein Spezialist kann die Notwendigkeit einer solchen Studie feststellen. Auch die Entschlüsselung der PCR-Analyse erfordert eine professionelle Herangehensweise. Befolgen Sie den Rat Ihres Arztes und führen Sie keine Tests durch, die Sie nicht benötigen.
