Laut WHO-Statistiken sind in den letzten 40 Jahren 25 Millionen Menschen an AIDS gestorben. Der Schaden durch diese Infektion ist enorm. Die meisten Infizierten befanden sich in Afrika, woher diese Infektion kam. Bei HIV wird die Diagnose der Krankheit besonders relevant. Zwar gibt es noch keine Heilung für HIV, aber eine frühzeitige Behandlung kann das Leben des Patienten verlängern und dessen Qualität verbessern.
Diagnose einer HIV-Infektion
HIV-Infektion wird in verschiedenen Stadien mit den folgenden Methoden bestimmt:
- ELISA - Enzymimmunoassay.
- Western Blot.
- PCR - Polymerase-Kettenreaktion.
- Schnelltests.
Die PCR-Methode wurde von dem amerikanischen Biochemiker Kary Mullis entwickelt, der dafür 1983 den Nobelpreis erhielt. Heute gilt diese Methode in der Medizin bei der Diagnose aller Infektionen aufgrund ihrer Genauigkeit und ihres Informationsgeh alts als führend. HIV ist in dieser Hinsicht keine Ausnahme.
Die Essenz der Analyse
Jede lebende Zelle enthält RNA und DNA. Diese Nukleinsäuren sind zur Selbstkopie und Selbstreplikation fähig. Für jede Infektion sind DNA-Fragmente einzigartig. BEIMin biologischen Flüssigkeiten zirkulieren diese Fragmente von Nukleinsäuren. Sie werden von einer speziellen Ausrüstung - dem Reaktor - eingefangen und erkannt. Dies ist die Grundlage der Methode. Die Laborantin zählt diese Bruchstücke. Das Retrovirus HIV wird auf RNA überwacht. Selbst einzelne Kopien von Viruspartikeln können durch PCR nachgewiesen und gezählt werden.
Venöses Blut wird am häufigsten als Testflüssigkeit verwendet. Die speziellen Komponenten des Verfahrens binden an die Viruspartikel und machen sie nachweisbar, weil die gefundenen Fragmente vervielfältigt werden.
Im Fall von HIV kann das Ergebnis des Vorhandenseins des Virus erh alten werden, lange bevor die Klinik erscheint. Daher hat die PCR aufgrund ihrer hohen Sensitivität einen so hohen diagnostischen Wert. Ein großes Plus der PCR ist die Vielseitigkeit der Methode. Die Inkubationszeit der Infektion für die PCR ist kein Hindernis.
Forschungskosten
PCR-Methode ist ziemlich teuer. Dies ist einer der großen Nachteile. Es erfordert modernste Geräte und hochqualifizierte Laborassistenten. Vor diesem Hintergrund wird die PCR-Diagnostik in kleinen Siedlungen nicht durchgeführt. Sie können sich nur in spezialisierten großen Kliniken testen lassen.
Die Kosten für HIV-DNA-Tests in Moskauer Kliniken beginnen bei 2.800 Rubel, die Viruslast (virale RNA im Plasma) wird durch PCR bestimmt - ab 8.800 Rubel und die HIV-Resistenz gegen Protease-Inhibitoren - ab 16.500 Rubel. Wie Sie sehen können, sind die Preise ziemlich hoch. PCR kann kostenlos in öffentlichen Kliniken im Rahmen der MHI-Richtlinie durchgeführt werden. Wichtig,dass das Verfahren anonym durchgeführt werden kann. Im Register erhält der Patient eine Nummer, anhand derer er das Ergebnis erfahren kann. In modernen medizinischen Zentren gibt es persönliche Kundenkonten, in die diese Daten eingegeben werden.
Forschungsziele
PCR-Diagnostik für HIV wird in solchen Fällen verordnet:
- Nachweis einer Infektion bei einem Kind, das von einer kranken Mutter oder Trägerin geboren wurde, um eine intrauterine Infektion festzustellen.
- Wenn der ELISA fragwürdige Ergebnisse lieferte (PCR für HIV hilft in diesem Fall, eine endgültige Diagnose zu stellen).
- Um den quantitativen Geh alt des Virus im Körper festzustellen.
- Bei einem positiven Immunoblot ergänzen sie sich bei der PCR.
- Spender testen.
- Zur Früherkennung von HIV.
- Zur Bestimmung der Wirksamkeit und Resistenz gegenüber ART.
Der Vorteil dieser Analyse ist, dass die PCR für HIV auch bei Kindern unter einem Jahr durchgeführt werden kann.
Forschung wird oft nicht zur Primärdiagnose, sondern bereits im Behandlungsprozess durchgeführt. Primärdiagnostik sind serologische Untersuchungen (sie bestimmen den Antikörperspiegel gegen HIV). Wenn ein falsch-positives Ergebnis wiederholt wird, kann dies an einer niedrigen Viruslast liegen.
PCR diagnostiziert HIV, wenn noch keine Antikörper dagegen vorhanden sind. Die ELISA-Methode gibt in diesem Fall keine Antwort.
Und die PCR für HIV wird bereits positiv sein. Aber die Symptome dieser HIV-Phase sind unspezifisch. Der Patient wird zunächst lange und erfolglos wegen ARVI von einem Hausarzt behandelt. Es sollte bedacht werden, dass die Diagnose von HIV nur darauf basiertPCR wird nicht gestellt, es ist notwendig, andere umfassende Tests zu bestehen. Die PCR-Methode ist in schwierigen Fällen häufiger hilfreich.
Analyse vorbereiten
Vor der Durchführung der PCR für HIV sollten Sie 2 Tage vor dem Test keine fetth altigen Speisen und keinen Alkohol zu sich nehmen. Es ist auch besser, sich geistig und körperlich nicht anzustrengen. Wenn dem Patienten eine Immunstimulation verschrieben wird, wird diese 2 Wochen vor der Analyse abgebrochen.
Blut nimmt man am besten morgens ab. Andere biologische Flüssigkeiten des Körpers (Sperma, Vaginalsekret) können ebenfalls untersucht werden, aber Blut ist das beste Material. Speichel, Schweiß, Urin und Tränen werden nicht verwendet, da der Virusgeh alt in ihnen minimal ist.
Pluspunkte der PCR für HIV
Die Vorteile der Methode sind die extrem geringe Wahrscheinlichkeit eines falsch positiven Ergebnisses, die Universalität der Reaktion für beliebige biologische Flüssigkeiten des Körpers. Die Analyse hat ein breites Spektrum:
- Eine Blutentnahme kann verwendet werden, um verschiedene Infektionen zu erkennen.
- Die Technik ist dringend, das Ergebnis ist schon am nächsten Tag fertig.
- Das Vertrauen liegt zwischen 85 und 98 %.
- Das Vorhandensein von HIV kann 10-14 Tage nach der Infektion festgestellt werden (zu diesem Zeitpunkt gibt es noch keine Antikörper).
- Keine Altersgrenze, kann sofort ab Geburt durchgeführt werden.
Nachteile der Methode
PCR hat folgende Nachteile:
- Analysekosten.
- Erfordert hochentwickelte medizinische Geräte.
- Benötigt hochqualifizierte Laborassistentin und Arzt,Nehmeranalyse.
- Die Reaktion ist sehr empfindlich, daher kann der Fehler 20 % betragen.
- Kann zu einem falsch positiven Ergebnis führen, wenn der Patient an Autoimmunprozessen, Onkologie oder chronischen Infektionen leidet.
- Besondere Sauberkeit der Laborräume ist erforderlich, da das Virus aus der Luft in die Analyse gelangen kann. Dann ist das Ergebnis falsch.
Für Laboratorien, die PCR durchführen, wurden zur Verbesserung der Qualität der Diagnostik spezielle strenge Maßnahmen gemäß dem SanPiN-System zur internen Kontrolle entwickelt. Darüber hinaus müssen alle Regeln der Arbeit mit dieser Technik eingeh alten werden:
- Erforderlich, um die Informationen auf den Reagenzgläsern genau zu befolgen.
- Sehen Sie vor der Blutentnahme noch einmal nach und vergewissern Sie sich, dass die Analyse geplant ist.
- Die Krankenschwester muss die Schläuche richtig beschriften.
- Der Laborant muss alle Manipulationen mit dem Biomaterial korrekt durchführen, um Kreuzkontaminationen zu vermeiden.
- Das Testsystem muss von ausgezeichneter Qualität sein.
Nur wenn alle diese Bedingungen erfüllt sind, kann der Fehler in der Antwort nur bei etwa 2 % der Episoden liegen.
Analysedauer
Viele interessieren sich dafür, wie lange die PCR für HIV fertig sein wird. Die Diagnose dauert nicht länger als 8 Stunden. Möglicherweise erhält der Patient bereits am nächsten Tag eine Antwort. Der Expresstest wird innerhalb von 2 Stunden durchgeführt.
PCR-Zuverlässigkeit
Trotz ihrer vielen Vorteile gilt die PCR nicht als ideales diagnostisches Verfahren. Er wird gegebenenfalls kontaktiertdie Notwendigkeit, Screening-Tests für das Vorhandensein von HIV im Körper zu erh alten.
Wann wird Blut zur Analyse entnommen?
Wie lange sollte man PCR gegen HIV einnehmen? Bereits bei einer Blutentnahme 4-4 Tage nach der angeblichen Infektion kann ein zuverlässiges Ergebnis erzielt werden. Nach 2 Wochen beträgt die Zuverlässigkeit für HIV 98% und nach 5 Tagen 80%. Das Vorhandensein eines negativen Ergebnisses in der PCR für HIV ist zuverlässig, aber für ein absolut genaues Ergebnis wird auch ELISA durchgeführt.
ELISA-Analyse ist nur wirksam, wenn Antikörper gegen das Virus vorhanden sind, diese Zeit kann 1-3 Monate bis zu sechs Monate dauern. Da ELISA eine höhere Wahrscheinlichkeit ergibt (98% -99,9%), kann PCR nicht als 100%iger Bestätigungstest für das Vorhandensein einer HIV-Infektion bezeichnet werden. Andererseits ist dies die einzige Technik, bei der Sie nicht auf das Auftreten von Antikörpern warten müssen.
Bei HIV kann die PCR Informationen über die Wirksamkeit der ART, das Stadium der HIV-Erkrankung und die Anzahl der VNs (eine quantitative Bewertung des Vorhandenseins von HIV im Körper) liefern. Dies spricht für die Schwere und das Ausmaß der Änderung.
PCR-Tests auf HIV sind auch dann erforderlich, wenn Antikörper im Blut vorhanden sind, deren Anwesenheit jedoch klinisch nicht die Zuverlässigkeit einer HIV-Infektion anzeigt.
Sie werden nicht nur auf Infektionen und gelegentlichen Sex getestet. Andere Gelegenheiten:
- Planung einer Schwangerschaft.
- Bevorstehender Vorgang.
- Gelegenheitssex.
- Manche Berufe verlangen diesen Test für die Zulassung zur Arbeit (Lehrer, Ärzte und anderes medizinisches Personal).
- Gefangene.
- TB-Patienten.
- Mitarbeiter des Katastrophenschutzministeriums und der Polizei.
- Aus dem Urlaub aus exotischen Ländern zurückgekehrt (wenn Sie sicher gehen wollen, dass keine Infektion vorliegt).
- Prostituierte.
- Ausländische Studierende.
- Drogen.
Außerdem können bestimmte Symptome bei einem Patienten einen HIV-Test erzwingen:
- Plötzlicher Gewichtsverlust.
- Durchfall, der länger als 3 Wochen andauert
- Unangemessen hohe Temperatur über einen langen Zeitraum.
- Angeschwollene Lymphknoten.
- Unerklärliche Ursache für Lungenentzündung, Candidiasis usw.
Die Entzifferung der Analyse ist Sache des behandelnden Arztes, nicht der Laborantin.
PCR oder ELISA, was ist besser?
Bei der PCR-Diagnose von HIV-Virus-RNA wird sowohl qualitativ als auch quantitativ nachgewiesen. Diese Analyse identifiziert eindeutig einen bestimmten Erreger, selbst wenn mehrere kreuzreagierende Erreger vorliegen. Biologisches Material kann auch in getrockneter Form verwendet werden. Der Nachteil ist die hohe Sensitivität der PCR, wenn selbst eine winzige Menge fremder DNA auf Instrumenten oder einem Reagenzglas zu einem falsch positiven Ergebnis führen kann.
Aufgabe und Möglichkeit des ELISA ist der Nachweis von Antikörpern gegen ein Retrovirus. Obwohl die Genauigkeit 99 % beträgt, ist sie im Anfangsstadium nicht anwendbar.
Qualitativer HIV-Test
Hochwertige PCR für HIV bestimmt das Vorhandensein des Virus im Körper. Die Ergebnisse sehen in diesem Fall so aus: positiv, falsch positiv, negativ. Aber diese Studie gibt keine Auskunft über die Menge an Retroviren. So eine qualitative Analyseunangemessen, wenn eine HIV-Infektion bereits auf andere Weise im Körper nachgewiesen wurde.
Es ist unmöglich, die Wirksamkeit der Behandlung mit hochwertiger PCR zu kontrollieren.
HIV-Quantifizierung
Nur von HIV-infizierten Personen durchgeführt, um die Anzahl der Kopien von Virus-RNA in einem biologischen Produkt zu zählen.
Der Zweck einer solchen Studie besteht darin, die laufende Behandlung zu überwachen und die Resistenz des Virus dagegen zu identifizieren. Die antivirale Therapie in solchen Berechnungen wird nicht blind von einem Arzt verschrieben, daher ist sie effektiver. Quantitative PCR für eine HIV-Infektion wird viel häufiger durchgeführt. Diese Analyse wird als Kopie/ml Blut angezeigt.
Welche Ergebnisse gegeben werden können:
- Virus-RNA fehlt oder ist sehr gering (ca. 20 Kopien/ml). Keine Diagnosesicherheit.
- Von 20 - bis 10 bis 6. Grades Kopien / ml - die Diagnose ist sicher.
- Mehr als 106 Kopien/ml - hohe VN.
Labore können Echtzeit-PCR-Tests auf HIV durchführen. Dies impliziert die Beobachtung und numerische Auswertung der Akkumulation von PCR-Produkten mit automatischer Ergebniserfassung.
